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New monoclonal antibodies to mesothelin useful for immunohistochemistry, fluorescence-activated cell sorting, Western blotting, and ELISA.
间皮素的新单克隆抗体可用于免疫组织化学、荧光激活细胞分选、 Western blotting 和 ELISA。

摘要

PURPOSE:Mesothelin is a cell surface protein that is highly expressed in some malignant tumors, and is a promising target for immunotherapy. Recent data suggests that mesothelin is an adhesive protein and may have a role in the metastases of ovarian cancer. Although a few monoclonal antibodies (MAb) to mesothelin have been produced, they have limitations for the study of expression of native mesothelin because of their low affinity or reactivity only with denatured mesothelin protein. We have produced novel MAbs to mesothelin to help study mesothelin function and to develop improved diagnosis and immunotherapy of mesothelin-expressing tumors.
EXPERIMENTAL DESIGN:Mesothelin-deficient mice were immunized with plasmid cDNA encoding mesothelin, and boosted with a mesothelin-rabbit IgG Fc fusion protein prior to cell fusion. Hybridomas were screened by an ELISA using plates coated with mesothelin-Fc protein.
RESULTS:Seventeen hybridomas producing anti-mesothelin antibodies were established and shown to react with two epitopes on mesothelin. One group reacts with the same epitope as the low affinity antibody K1 that was originally used to identify mesothelin. The other is a new group that reacts with a new epitope. One antibody from each group was chosen for further study and shown to react strongly on ELISA, on immunohistochemistry, and by fluorescence-activated cell sorting on living cells.
CONCLUSION:Our two newly established MAbs, MN and MB, have different and useful properties compared with current antibodies used for the detection of mesothelin by immunohistochemistry, fluorescence-activated cell sorting, ELISA, and Western blotting.

译文

目的: 间皮素是一种在某些恶性肿瘤中高表达的细胞表面蛋白,是一种有前途的免疫治疗靶点。最近的数据表明,间皮素是一种粘附蛋白,可能在卵巢癌转移中发挥作用。尽管已经产生了一些针对间皮素的单克隆抗体 (MAb),但由于其仅与变性间皮素蛋白的低亲和力或反应性,它们在研究天然间皮素表达方面具有局限性。我们已经生产了新的 mesothelin 单克隆抗体,以帮助研究 mesothelin 功能,并开发对 mesothelin 表达肿瘤的改进诊断和免疫治疗。
实验设计: 间皮素缺陷小鼠用编码间皮素的质粒 cDNA 免疫,并在细胞融合前用间皮素-兔 IgG Fc 融合蛋白增强。使用 mesothelin-Fc 蛋白包被的平板通过 ELISA 筛选杂交瘤。
结果: 建立了 17 个产生抗间皮蛋白抗体的杂交瘤,并显示与间皮蛋白上的两个表位反应。一组与最初用于鉴定间皮素的低亲和力抗体 K1 相同的表位反应。另一个是一个与新抗原反应的新群体。从每组中选择一种抗体进行进一步研究,显示其对 ELISA 、免疫组织化学和活细胞荧光激活细胞分选有强烈反应。
结论: 我们的两个新建立的单克隆抗体,MN 和 MB,与目前用于免疫组织化学、荧光激活细胞分选、 ELISA 检测间皮素的抗体相比,具有不同的有用性质, 和 Western blotting。

Fluorescence-Activated Cell Sorting

肿瘤 细胞分析 实验技术
概述  :  

荧光激活细胞分选(FACS),也叫做流式细胞分选(FCMS,flow cytometry sorting)。该技术是利用流式细胞分选仪,以高能量激活照射高速流动状态下被荧光色素染色的单细胞或微粒,测量其产生的散射光和发射荧光的强度,从而对细胞(或微粒)的物力、生理、生化、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行定性或定量检测的一种现代细胞分析技术。该技术是上世纪70年代发展起来的高科学技术,集计算机技术、激光技术、流动力学、细胞化学以及细胞免疫学于一体。该技术不仅可以测量细胞大小、内部颗粒

Fluorescence   英 /flʊə'res(ə)ns; flɔː-/   美 /flʊə'rɛsns/
释    义   n. 荧光;荧光性
同根词   adj.fluorescent 荧光的;萤光的;发亮的
例    句   The dashboard itself is divided into three vacuum Fluorescence Displays.  仪表板本身划分为三个真空荧光显示器。
 
Activated   英 /'æktɪveɪtɪd/   美 /'æktə,vetɪd/ 
释    义   adj. 活性化的;活泼的
               v. 使激活;使活动起来;有生气(activate的过去分词)
同根词   adj.active 积极的;活跃的;主动的;有效的;现役的
例    句   Once each download is complete, the codes will be activated through beams of light.   一旦每个下载都完成了,代码在光柱作用下将被激活。
 
Cell   英 /sel/   美 /sɛl/ 
释    义   n. 细胞;电池;蜂房的巢室;单人小室
               vi. 住在牢房或小室中
同根词   n.cellularity 细胞性;多孔性;细胞结构
例    句   Each cell can only be owned by one feature.   每个细胞只能拥有一特征。
 
Sorting   英 /'sɔːtɪŋ/   美 /'sɔrtɪŋ/
释    义   n. [计] 排序;整理;分类拣选
同根词   adj.sorted 分类的;分选的;挑选的
例    句   How do you test speed of sorting algorithm?   如何测试排序算法的速度?

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