Fluorescence   英  [flʊə'res(ə)ns; flɔː-]   美  [flʊə'rɛsns]

释    义   n. 荧光；荧光性

同根词   adj.fluorescent 荧光的；萤光的；发亮的

例    句   This approach uses fluorescence instead of magnetism to image samples.  该方法利用的是荧光而非影像样本的磁性。

in   英  [ɪn]   美  [ɪn]

释    义   prep. 在……内，在……里；进……里；在……期间；在……以后；穿着；在……状态中；在……方面；包含在……中；

               adv. 进入；在里头；到达；当选；上涨，涨潮；在屋里；在车站；收到；递交，送到；

               adj. 在里面的；时髦的；（用球）界内的

               n. 执政者；门路

例    句   He was a big man, dressed in a suit and tie.  他是个高大的男人，穿着西服、打着领带。

situ   英  [sɪtju:]   美  [ˈsaɪtu]

释    义   n. 原地

例    句   Back to square one! Nothing stood in the distance vision in situ!  回到原点！站在原地憧憬一无所有的远方！

hybridization   英  [,haɪbrɪdaɪ'zeɪʃən]   美  [,haɪbrɪdɪ'zeʃən]

释    义   n. 杂交；配种；[化学] 杂化；杂种培殖

同根词   adj.hybrid 混合的；杂种的

例    句   Detection and analysis of the hybridization graph.  杂交图谱的检测和分析。

概述

荧光原位杂交技术，简称FISH，是利用荧光标记的特异核酸探针与细胞内相应的靶DNA或RNA分子杂交，通过在荧光显微镜或共聚焦激光扫描仪下观察荧光信号，来确定与特异探针杂交后被染色的细胞或细胞器的形态和分布，或者是结合了荧光探针的DNA区域或RNA分子在染色体或其他细胞器中的定位。该技术能够在组织、细胞等水平上对DNA或RNA进行定性、定位以及定量分析。

原理

FISH检测技术是一种重要的非放射性原位杂交技术，它的基本原理是：如果被检测的染色体或DNA纤维切片上的靶DNA与所用的核酸探针是同源互补的，二者经变性-退火-复性，即可形成靶DNA与核酸探针的杂交体。将核酸探针的某一种核苷酸标记上报告分子，例如生物素、地高辛，可利用该报告分子与荧光素标记的特异亲和素之间的免疫化学反应，经荧光检查体系在镜下对待检测的核酸物质（DNA、RNA）进行定性、定量或相对定位分析。

采用FISH技术分析的标本可以是分裂期细胞染色体也可以是间期细胞，间期细胞可以是冰冻切片，也可以是细胞滴片或印片。生物素(biotion)、地高辛(digoxigenin)、二硝基苯基(dinitrophenyl, DNP)等均可用于探针标记，前两者较为常用。通常采用切口平移法或随机引物法对探针进行标记，在已知探针DNA结构及序列的情况下也可采用PCR或RNA逆转录法进行探针标记。

FISH实验的基本实验流程是：FISH样本的制备、探针的制备、探针标记、杂交染色体显带、荧光显微镜检测、结果分析。

特点

FISH技术问世于上世纪70年代后期，其曾多用于染色体异常的研究，近年来随着FISH所应用的探针种类的不断增多，特别是全Cosmid探针及染色体原位抑制杂交技术的出现，使FISH技术不仅在细胞遗传学方面，而且还广泛应用于肿瘤学研究，比如基因诊断、基因定位等。经过较多改进后的FISH技术，目前具有以下特点：1、操作简便、立体分辨率高、观察分析方便、信号明亮清晰以及安全风险小；2、检测速度及探针稳定性比放射性标记探针好，探针标记后稳定，一次标记后可使用两年；3、方法敏感，能迅速得到结果；4、在同一标本上，利用不容颜色的荧光集团标记探针可同时检测几种不同的目标物质；5、不仅可用于分裂期细胞染色体数量或者结构变化的研究，而且还可用于间期细胞的染色体数量及基因改变的研究；6、标记探针和荧光素试剂均可购置，使得FISH程序直接而且可靠；7、某种特别种类的完整基因组、整个染色体、染色体亚区域或单拷贝序列依所用探针的复杂性可特异地区分开来；8、重复序列的杂交可被未标记基因组的DNA同探针预杂交而抑制，这对定位在大植入探针中的独特序列是决定性的。

应用

FISH技术很早就应用于在临床检测，目前因为该技术具有较多独特的优点，所以应用的范围越来越广，可归纳为以下几个方面：1、在临床细胞遗传学方面的应用；因为FISH技术不受细胞分裂周期的影响，可以对中期染色体、间期核及伸展染色质纤维进行快速、精确的检测，因此其广泛应用于遗传病诊断、产前诊断、不孕原因分析以及多种遗传病的分型及诊断中，且已有商品化的探针等可供利用；2、应用于肿瘤诊断；染色体重排与肿瘤疾病的诊断和预后半段有密切关系，已有一系列商品化的单一拷贝基因座特异性探针用于在单个细胞水平检测易位、倒位、缺失和癌基因扩增等；目前FISH技术是决定乳腺癌的预后和治疗反应最准确的方法，也是儿童软组织肿瘤诊断的主要工具，另外对其他肿瘤的诊断也多有报道。3、应用于病原体的检测；FISH技术用于病原体检测的探针为各种病原体的rRNA探针，包括种、属、群特异性的探针。利用该方法可对许多病原体如HPV、HBV、SARS等病毒、细菌、真菌以及疟原虫等进行快速检测及分型，整个检测可在几小时内完成，其特异性和灵敏度都较高。