Enzyme   英  ['enzaɪm]   美  ['ɛnzaɪm]

释    义   n. [生化] 酶

例    句   This change is considered to be due to denaturation of the enzyme.  据认为这种变化是由于酶的变性作用所造成的。

Linked   英  [lɪŋkt]   美  ['lɪŋkt]

释    义   v. 把……连接起来；相关联；说明（两者间）有联系；挽住，勾住；（使）挂钩（link 的过去式及过去分词）

               adj. 连接的；显示连环遗传的

同根词   n. link [计] 链环，环节；联系，关系

例    句   They then try to trace through every piece of data linked through those.  然后，它们通过尝试去追踪这些数据链接到每一个数据。

Immunosorbent   [,imjunəu'sɔ:bənt]

释    义   n. 免疫吸收剂

例    句   We measured the plasma PTX3 levels in 196 patients with heart failure and 60 control subjects without heart failure by sandwich enzyme-linked immunosorbent assay.  我们通过夹心酶联免疫吸附试验测量了196名心力衰竭患者和60名非心力衰竭对照者的血清PTX3水平。

Assay   英  [ə'seɪ; 'æseɪ]   美  [ə'se]

释    义   n. 化验；试验

               vt. 分析；化验；尝试

               vi. 鉴定；经检验证明内含成分

同根词   n.assayer 试金者，尝试者；分析专家

例    句   Do not cross you or go to a hospital assay.  不过你还是去医院化验一下吧。

概述

酶联免疫吸附检测(ELISA)，是实验室最为常见的检测方法，是在免疫酶技术（immunoenzymatic techniques）的基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术。该检测方法是将可溶性的抗原或是抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上，利用抗原抗体反应专一性以及酶催化放大作用进行定性及定量分析的技术。酶是能够催化化学反应的特殊蛋白质，其催化效力超过所有人造催化剂，酶标记抗原或是抗体以后，既不影响抗原抗体反应的特异性，也不改变酶本身的活性。因此，ELISA具有准确性高、检测时间短、价格低廉、判断结果有客观标准、结果便于记录和保存等优点，适合于大批样本的检测，广泛用于免疫实验分析、医疗检测等相关领域。

原理

用于免疫酶技术的酶有很多，比如过氧化物酶，碱性磷酸酯酶，β-D-半乳糖苷酶，碳酸酐酶，一线胆碱酯酶等。常用与ELISA的酶有辣根过氧化物酶，碱性磷酸酯酶等，其中尤以辣根过氧化物酶为多（HRP）。ELISA基本原理有以下三条：1、使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。2、使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅来进行定性或定量分析。由于酶的催化频率很高，故可极大地地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度。

方法分类

ELISA可用于检测抗原，也可用于检测抗体。根据试剂来源和样本的性状以及检测条件等，可采用不同类型的检测方法。对抗原检测的方法主要有以下几种：1、直接法检测抗原；将待检测的抗原吸附在载体表面（一般为96孔板），加入酶标抗体，形成抗原-抗体复合物，随后加入酶促反应底物，进行显色反应。2、双抗体夹心法检测抗原，该方法是抗原检测中最常用的方法；该方法流程是先加入抗体，使抗体固定结合于载体表面，再加入待检样品，使目标检测抗原与固定于平板上的抗体形成抗原-抗体复合物，随后加入酶标抗抗体（抗原免疫第二种动物获得的抗体），形成抗体-抗原-抗体复合物，最后加入酶促反应底物，发生显色反应，显色的深浅与待检测抗原的量成正比。3、竞争法检测抗原；当小分子抗原或是半抗原缺乏可作夹心法的两个以上的抗体结合位点，则不能采用双抗体夹心法进行检测，可采用竞争法；该方法先将特异性抗体吸附于固相载体表面，经洗涤后分成两组：一组加入梯度浓度比例的待检样品和酶标记抗原混合液，而另一组只加酶标记抗原，再经孵育洗涤后加底物显色，这两组底物显色量之差即所要测定的待检抗原的量。

另外检测抗体样品的方法则为以下几种：1、双抗原夹心法；双抗原夹心法的反应模式与双抗体夹心法类似；先加入抗原，使抗体固定结合与载体表面，再加入样品使目标检测抗体形成抗原-抗体复合物，随后加入酶标抗原，形成抗原-抗体-抗原复合物，最后酶促反应底物进行显色，显色的深浅与待检测抗体的量呈正比。2、 间接法，该方法是检测抗体最常用的方法；其基本原理为利用酶标记的抗抗体以检测与固相抗原结合的受检抗体，故称为间接法；该方法主要用于对病原体抗体的检测而进行传染病的诊断；流程为先将特异性抗原与固相载体联结，形成固相抗原，再加入待检测样品（例如稀释的受检血清等），形成固相抗原-抗体复合物，随后加入酶标记的抗抗体，最后加入酶促反应此物进行显色，显色的深浅与待检抗体的量成正比。除了这两种检测抗体的方法外，还有竞争法（与竞争法检测抗原类似）以及捕获包被法等等，可用于检测抗体。