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A novel enzyme-linked immunosorbent assay using a mixture of human native and recombinant proteinase-3 significantly improves the diagnostic potential for antineutrophil cytoplasmic antibody-associated vasculitis.
使用人天然和重组蛋白酶-3 的混合物的新型酶联免疫吸附试验显著提高了抗中性粒细胞胞浆抗体相关性血管炎的诊断潜力。

摘要

BACKGROUND:Antineutrophil cytoplasmic antibodies (ANCA) with a C-ANCA or P-ANCA pattern are detected in ANCA-associated vasculitis (AAV). While in most patients with AAV a C-ANCA pattern is due to reactivity with proteinase-3 (PR3)-ANCA, some C-ANCA-positive sera do not react with PR3.
OBJECTIVE:The development and evaluation of a direct enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for PR3-ANCA with increased sensitivity.
METHODS:A mixture of human native (hn) and human recombinant (hr) PR3 was used as antigen coating. The resulting ELISA (anti-PR3-hn-hr) was compared with ELISAs using directly coated hn-PR3 or hr-PR3, as well as with a hn-PR3 capture ELISA. Assay characteristics were determined in patients with AAV (n = 248), with special attention for those patients with C-ANCA (n = 132), as well as disease controls (n = 585) and healthy controls (n = 429). Additionally, for prediction of relapses serial samples of 46 patients with PR3-AAV were analysed.
RESULTS:At a predefined specificity of 99% both ELISAs containing hr-PR3 revealed a substantial increase in sensitivity. For the prediction of relapses by rises in PR3-ANCA titres the capture ELISA was most optimal (odds ratio 12.5). With an odds ratio of 8.9 the novel anti-PR3-hn-hr ELISA was second best.
CONCLUSIONS:Owing to the very high sensitivity of the novel anti-PR3-hn-hr ELISA for the detection of PR3-ANCA in C-ANCA-positive samples of patients with AAV this assay has an excellent diagnostic performance. This feature is combined with a good predictability of clinical relapses in patients with PR3-AAV. These characteristics challenge the dogma that, for detection of PR3-ANCA, capture ELISAs are superior for diagnosis and follow-up.

译文

背景: 在 ANCA 相关性血管炎 (AAV) 中检测到具有 C-ANCA 或 P-ANCA 模式的抗中性粒细胞胞浆抗体 (ANCA)。虽然在大多数 AAV 患者中,C-ANCA 的模式是由于与蛋白酶-3 (PR3)-ANCA 的反应性,但一些 C-ANCA 阳性血清与 PR3 没有反应。
目的: 建立和评价一种用于敏感性提高的 PR3-ANCA 的直接酶联免疫吸附试验 (ELISA)。
方法: 用人天然 (hn) 和人重组 (hr) PR3 的混合物作为抗原包被。将产生的 ELISA (anti-PR3-hn-hr) 与使用直接包被 hn-PR3 或 hr-PR3 的 ELISAs 以及 hn-PR3 捕获 ELISA 进行比较。在 AAV 患者 (n = 248) 中确定了检测特征,特别关注那些 C-ANCA 患者 (n = 132) 以及疾病对照 (n = 585) 和健康对照 (n = 429)。此外,为了预测复发,对 46 例 PR3-AAV 患者的连续样本进行了分析。
结果: 在预定义的特异性为 99% 时,包含 hr-PR3 的 ELISAs 显示灵敏度大幅提高。对于通过 PR3-ANCA 滴度上升来预测复发,捕获 ELISA 是最理想的 (比值比为 12.5)。优势比为 8.9 的新型 anti-PR3-hn-hr ELISA 排名第二。
结论: 由于用于检测 AAV 患者 C-ANCA 阳性样本中 anti-PR3-hn-hr 的新型 PR3-ANCA 酶联免疫吸附试验具有很高的灵敏度,该试验具有良好的诊断性能。这一特征与 PR3-AAV 患者临床复发的良好预测相结合。这些特征挑战了对于 PR3-ANCA 的检测,捕获 ELISAs 优于诊断和随访的教条。

Enzyme Linked Immunosorbent Assay

肿瘤 免疫检测 实验技术
概述  :  

酶联免疫吸附检测(ELISA),是实验室最为常见的检测方法,是在免疫酶技术(immunoenzymatic techniques)的基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术。该检测方法是将可溶性的抗原或是抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上,利用抗原抗体反应专一性以及酶催化放大作用进行定性及定量分析的技术。酶是能够催化化学反应的特殊蛋白质,其催化效力超过所有人造催化剂,酶标记抗原或是抗体以后,既不影响抗原抗体反应的特异性,也不改变酶本身的活性。因此,ELISA具有准确性高、检测时间短、价格低廉、判断

Enzyme   英  ['enzaɪm]   美  ['ɛnzaɪm]

       n. [生化] 酶

       This change is considered to be due to denaturation of the enzyme.  据认为这种变化是由于酶的变性作用所造成的。

 

Linked   英  [lɪŋkt]   美  ['lɪŋkt]

       v. 把……连接起来;相关联;说明(两者间)有联系;挽住,勾住;(使)挂钩(link 的过去式及过去分词)

               adj. 连接的;显示连环遗传的

同根词   n. link [计] 链环,环节;联系,关系

       They then try to trace through every piece of data linked through those.  然后,它们通过尝试去追踪这些数据链接到每一个数据。

 

Immunosorbent   [,imjunəu'sɔ:bənt]

       n. 免疫吸收剂

       We measured the plasma PTX3 levels in 196 patients with heart failure and 60 control subjects without heart failure by sandwich enzyme-linked immunosorbent assay.  我们通过夹心酶联免疫吸附试验测量了196名心力衰竭患者和60名非心力衰竭对照者的血清PTX3水平。

 

Assay   英  [ə'seɪ; 'æseɪ]   美  [ə'se]

       n. 化验;试验

               vt. 分析;化验;尝试

               vi. 鉴定;经检验证明内含成分

同根词   n.assayer 试金者,尝试者;分析专家

       Do not cross you or go to a hospital assay.  不过你还是去医院化验一下吧。

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