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transfection

肿瘤

关键词肿瘤 实验技术 转化

词汇介绍

拓展阅读

解析

Transfection   /trænz'fɛkʃən/

释    义   n. [遗] 转染

例    句   However, they found that RNA transfection poses a significant challenge: When added to mature human skin cells, mRNA provokes an immune response meant to defend against viruses made of RNA. 但是,他们发现,用RNA转染面临着巨大的挑战:当将mRNA添加到成熟的人体皮肤细胞时,信使RNA产生了强烈的免疫反应来排斥RNA病毒。

概述

转染采用与质粒DNA转化受体细胞相似的方法,即宿主菌先经过CaCl2,电穿孔等处理成感受态细菌,再将重组噬菌体DNA直接导入受体细胞,进入感受态细菌的噬菌体DNA可以同样复制和繁殖,这种方式称为转染。 转染是转化的一种特殊形式。常规转染技术分为两大类,一类是瞬时转染,一类是稳定转染(永久转染)。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中,因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数,产生高水平的表达,但通常只持续几天,多用于启动子和其它调控元件的分析。一般来说,超

Discovery, characterization and potential roles of a novel NF-YAx splice variant in human neuroblastoma复制标题

人类神经母细胞瘤中一种新型NF-YAx剪接变异体的发现、表征和潜在作用

发表时间:2019-12-05

影响因子:5.6

作者: Lucia Cappabianca

期刊:J. Exp. Clin. Cancer Res.

NF-YAx cDNA was RT-PCR-cloned from a stage 3 NB (provided by the Italian Association of Haematology and Paediatric Oncology, Genova, IT), sequenced and expressed as a protein using standard methods and compared to known fully-spliced NF-YAl and exon B-skipped NF-YAs isoforms in: EMSAs for capacity to form NF-Y complexes; by co-transfection, co-immunoprecipitation and Western blotting for capacity to bind Sp1; by IF for localisation; in AO/EtBr cell-death and colony formation assays for relative cytotoxicity, and by siRNA knockdown, use of inhibitors and Western blotting for potential mechanisms of action.

译文

NF-YAx cDNA从3期NB(由意大利血液学和儿科肿瘤学协会提供,Genova,IT)中克隆,用标准方法测序并表达为蛋白质,并与EMSA中已知的完全剪接的NF-YAl和外显子B-跳过的NF-YAs亚型进行比较,以形成NF-Y复合物;通过共转染,联合免疫沉淀和Western印迹法结合SP1的能力;IF用于定位;在AO /ETBR细胞死亡和集落形成试验中进行相对细胞毒性,并通过siRNA敲除,使用抑制剂和Western印迹法寻找潜在的作用机制。 此外,还通过RT-PCR和Western blotting对所有三种NF-YA亚型的稳定SH-SY5Y转染体进行了增殖,比较了它们在细胞死亡和干细胞相关基因表达方面的差异,以及在细胞死亡检测中对阿霉素和体外增殖的敏感性,与基质无关的生长和体内肿瘤异种移植的生长和成瘤能力的差异分析。