BIX-01294

释    义   n. 一种选择性的G9a组蛋白甲基转移酶抑制剂

例    句   In this study, we have analyzed the dynamics and possible role of histone H3K9 methylation, a major repressive modification, as well as the effects on microspore embryogenesis initiation of BIX-01294, an inhibitor of histone methylation, tested for the first time in plants, in Brassica napus and Hordeum vulgare.在本研究中，我们分析了组蛋白H3K9甲基化的动态和可能的作用，以及BIX-01294对小孢子胚胎发生起始的影响，BIX-01294是组蛋白甲基化的抑制剂，这是首次在植物、甘蓝型油菜和大麦中进行了检测。

概述

组蛋白甲基化受特异性组蛋白甲基转移酶和去甲基化酶联合调控，而且是一个可逆的动态过程。EHMT2（G9a）作为一种重要的甲基化转移酶，在细胞生长的表观遗传调节中十分重要。有研究表明EHMT2和G9a样蛋白可以使肿瘤抑癌基因TP53甲基化，从而失去活性，在前列腺癌、膀胱癌、白血病中均表现为EHMT2的升高。如果敲除EHMT2则肿瘤的生长明显受到抑制，说明EMT2介导的组蛋白甲基化与肿瘤发生发展有密切关系。BIX-01294是一种EHMT2的人工抑制剂，是研究者通过高通量筛选125000个化合物后发现的，具有高度的EHMT2选择性。能下调H3K27me2的表达，且不会改变H3K9me1和H3K9me3的表达水平，也不会改变H3K27、H3K36和H4K20的甲基化表达。在膀胱移行细胞癌中，BIX-01294通过介导AMPK/mTOR信号通路促进细胞自噬，从而调控肿瘤的生长。

体外研究

BIX01294是选择性的G9a组蛋白甲基转移酶抑制剂，在实验浓度范围内不影响SUV39H1(H320R)和PRMT1。BIX-01294特异性抑制G9a (H3K9me2)，并在较小程度上抑制密切相关的GLP酶（主要是H3K9me3），作用于G9a和GLP，IC50分别为1.7μM和38μM。BIX-01294抑制G9a，与SAM按非竞争性的方式。BIX-01294 (4.1μM)作用于野生型ES细胞，小鼠胚胎成纤维细胞和HeLa细胞，而非缺乏G9a的干细胞，降低H3K9me2水平。BIX-01294是抑制有价值的染色体H3K9me2瞬态调制的抑制剂。BIX-01294在一些G9a靶向基因上，包括Bim1 和Serac1，降低H3K9me2。BIX01294可使HIV-1病毒从潜伏感染的细胞，如ACH-2和OM10.1中重新表达。

BIX-01294诱导人膀胱癌细胞凋亡分子机制

BIX-01294抑制T24和5637这两种膀胱癌细胞系的存活，并呈剂量依赖性。并且BIX-01294能激活凋亡蛋白酶CASP级联反应，具有剂量和时间依赖效应。且在敲低EHMT2后增强了BIX-01294诱导的CASP级联反应。BIX-01294上调T24和5637细胞中PMAIP1的表达，同时能够下调MCL1的表达，具有剂量和时间依赖效应。在T24和5637细胞中敲低PMAIP1和过表达MCL1均能够拯救BIX-01294引起的凋亡。BIX-01294下调T24和5637细胞中USP9X的表达，具有剂量和时间依赖效应。敲低USP9X可以下调MCL1同时增强BIX-01294诱导凋亡的作用。BIX-01294上调T24和5637细胞中DDIT3的表达，具有剂量和时间依赖效应。敲低DDIT3可以拯救BIX-01294诱导的凋亡。BIX-01294在T24和5637细胞中上调内质网应激反应相关蛋白HSPA5、ERN1和ATF4，并具有剂量和时间依赖效应。在T24和5637细胞中敲低CASP8能够削弱BIX-01294诱导的细胞凋亡。BIX-01294上调T24和5637细胞中TNFRSF10A的表达，具有剂量和时间依赖效应。敲低TNFRSF10A可以削弱BIX-01294诱导的细胞凋亡。在T24和5637细胞中敲低DDIT3使BIX-01294引起的TNFRSF10A表达上调的程度减弱。所以，BIX-01294能够诱导人膀胱癌细胞凋亡，并与其抑制EHMT2的功能有关。综上所述，研究发现BIX-01294能诱导人膀胱癌细胞凋亡。BIX-01294诱导细胞凋亡的分子机制是：BIX-01294作为EHMT2特异性抑制剂，通过激活内质网应激反应，上调DDIT3的表达，进而通过PMAIP1-USP9X-MCL1内源途径和上调死亡受体TNFRSF10A激活外源途径诱导细胞凋亡。