HEK293

肾内泌尿

关键词肾内泌尿 实验材料 细胞

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HEK293

释    义   n. 人胚胎肾细胞293细胞系

例句 Immortalized human embryonic kidney cell line HEK293 and the human embryonic lung fibroblasts HELF were used as positive control and negative control, respectively.同时以端粒酶阳性的永生化人胚肾成纤维细胞HEK293作为阳性对照,以端粒酶阴性的人胚肺成纤维细胞HELF作为阴性对照。

概述

概述


HEK 293细胞系,又称hek293hek293293细胞1973年,最原始的HEK293细胞来源于一个夭折的人类胚胎肾细胞中。将人的胚胎肾细胞中转化入人5型腺病毒DNA片段,得到的细胞即为HEK 293细胞。最初,这些细胞是从健康流产的胎儿中合法提取的。多年来,HEK 293细胞系被认为是由成纤维细胞或上皮细胞的转化而产生的。尽管这些物质在肾脏中很丰富,但最初的腺病毒转化效率很低。因此,研究人员开始怀疑产生HEK 293细胞系的细胞是否异常。随后,进行一系列的实验来分析细胞的基因组和转录体。结果表明,HEK 293与肾上腺细胞的hek293模式相似,具有多种神经元特性。因此,HEK 293细胞被认为是肾上腺细胞的体外模型,而不是典型的肾细胞。目前,HEK293细胞被广泛用于生产蛋白、疫苗、抗癌试剂及重组腺病毒包被等。


HEK293细胞系


HEK293细胞系有可以进一步分为293T细胞、293H细胞、293F细胞和293S细胞。而293T细胞又可分为293T/17细胞和293T/17 SF细胞两种。293H细胞又可分为293E细胞和293-6E细胞两种。293F细胞也可分为293F293FT等三种细胞。293S细胞又可分为293SG等两种细胞系,所以HEK293细胞系一共有9种细胞。它们的特点举例如下:(1293T胞:293细胞中转入SV40T-antigen基因形成的高转衍生株,即为293T细胞系。这使得包含SV40ori的质粒能够在该细胞系中显著扩增,从而促进表达载体的扩增,促进蛋白的表达。293T细胞除了可用于各类基因表达及蛋白生产,还可用于高滴度逆转录病毒及其他病毒生产,如腺病毒及其他哺乳动物病毒。2293T/17细胞293T细胞中共转染入pBNDpZAP质粒,获得的具有G418耐受的细胞系即为293T/17细胞系。该细胞系在保有293T细胞的优良性能之外,还具有高转染性的特点。3293H细胞293H细胞则指的是将293细胞驯化后得到的能够在无血清培养体系下快速生长、具有高转染效率及高效蛋白表达性能的细胞系。另外,该细胞系贴附力好,而被用于噬菌斑检测等应用。4293E细胞293E细胞指的是在293-H细胞中插入EBNA-1基因的细胞系,该基因能够稳定表达EBV病毒的EBNA1蛋白。含有EBV复制起点(oriP)的重组表达质粒,能够在H293E细胞中复制,并实现蛋白的高效表达。5293S细胞293S细胞则指的被驯化成能够悬浮培养且能够耐受低钙离子培养条件的293细胞系。


应用


HEK 293细胞系可用于多种研究。例如,它可用于研究药物对钠通道的影响、可确定的RNA干扰系统和蛋白质中的核输出信号等。更具体地说,HEK 293细胞被用于腺病毒载体的繁殖。利用病毒进化目标基因并将其转移到细胞中是一种有效的方法。然而,由于病毒作为病原体的特性,它们也会带来风险。因此,为了繁殖这种病毒载体,需要一种能够表达缺失基因的细胞系。由于HEK 293细胞含有许多腺病毒基因,因此利用它们来传播这些基因所在的腺病毒载体是非常理想的。由于其容易转染,也容易培养,所以经常用于转染试验。

Discovery of a Novel 2,5-dihydroxycinnamic Acid-Based 5-lipoxygenase Inhibitor That Induces Apoptosis and May Impair Autophagic Flux in RCC4 Renal Cancer Cells复制标题

基于2,5-二羟基肉桂酸的5-脂氧合酶抑制剂的发现可诱导RCC4肾癌细胞凋亡并可能损害自噬通量

发表时间:2019-10-01

影响指数:4.8

作者: Selka A

期刊:Eur J Med Chem

The inhibition of 5-lipoxygenase (5-LO), the key enzyme for the biosynthesis of leukotrienes (LTs), has generated increasing enthusiasm as anti-inflammatory and antitumor strategies in recent years. Based on our previous studies, we synthesized a series of dihydroxycinnamic acid-based analogs that might be 5-LO inhibitors. LTs biosynthesis inhibition in HEK293 cells and polymorphonuclear leukocytes (PMNL) was measured and antitumor activities were investigated in Renal Cell Carcinoma (RCC). Results showed that the 2,5-dihydroxycinnamic acid phenethyl ester (10b) was the best 5-LO inhibitor and was 7-fold more potent than Zileuton (1), the only clinically approved 5-LO inhibitor. 2,5-Dihydroxy substitution was more favorable to 5-LO inhibition since compound 10b is twice as active as CAPE (2) which is a 3,4-dihydroxylcinnamic acid ester. Meanwhile, 10b reduced the cell viability of renal cancer cells and was more selective toward RCC4 and 786.0 cells which are deficient for the Von Hippel-Lindau (VHL) tumor suppressor gene. As to the underlying cell-death mechanisms, 10b induced apoptosis in VHL-deficient RCC4 cells. Also, increases in LC3B and p62 expression suggest a blockage of the autophagic flux in RCC in response to 10b.

译文

5-脂氧合酶(5-LO)是白三烯(LTs)生物合成的关键酶,近年来作为抗炎和抗肿瘤策略受到越来越多的关注。在前人研究的基础上,我们合成了一系列可能是5-LO抑制剂的二羟基肉桂酸类似物。检测其在HEK293细胞和多形核白细胞(PMNL)中的生物合成抑制作用,并研究其在肾癌(RCC)中的抗肿瘤活性。结果表明,2,5-二羟基肉桂酸苯乙酯(10b)是5-LO抑制剂的最佳选择,其药效是临床唯一批准的5-LO抑制剂齐鲁通(1)的7倍。由于化合物10b的活性是3,4-二羟基肉桂酸酯CAPE(2)的两倍,因此2,5-二羟基取代更有利于5-LO的抑制。同时,10b降低了肾癌细胞的存活率,对VHL抑癌基因缺失的RCC4和786.0细胞有更高的选择性。在细胞死亡机制方面,10b可诱导VHL缺乏的RCC4细胞凋亡。此外,LC3B和p62表达的增加表明10b引起的肾癌自噬通量的阻断。

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