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Radial Immuno-diffusion (RID)

免疫

关键词免疫 实验技术 环状免疫扩散法

词汇介绍

拓展阅读

解析

radial   英  /ˈreɪdiəl/  美  /ˈreɪdiəl/

释    义   n. 子午线轮胎;辐射道路;鳍辐骨;星形发动机;

               adj. 辐射状的;(身体)中心区域的;桡骨的

例    句   The white marble floors were inlaid in a radial pattern of brass.这些白色大理石地板镶嵌在铜质的放射形图案中。

 

immunodiffusion   英  /,ɪmjʊnəʊdɪ'fjuːʒ(ə)n; ɪ,mjuːnəʊ-/  美  /,imjunəudi'fju:ʒən/

释    义   n. [免疫] 免疫扩散

例    句   The titer of antiserum was detected by immunoelectrophoresis and double immunodiffusion.利用免疫电泳、向琼脂扩散试验分析和测定抗血清的效价。

概述

概述

 

环状免疫扩散法因操作方法简单,广泛应用于测定体液中Ig含量,血痕检材等方面。

 

环状免疫扩散免疫球蛋白测的实验方法

 

1.材料:抗IgG、抗IgA、抗IgM诊断血清及Ig参考血清,琼脂粉

 

2. 方法:用已融化并冷却至561.2%琼脂液稀释抗Ig血清,制成厚为1.5毫米的含杭Ig单价免疫血清琼脂板,用内径3.0毫米的打孔器打孔,孔距12-15毫米,每孔加入一定稀释度的待检血清10微升,加样后将琼脂板放湿盒内,密闭,置37恒温箱中,IgG扩散24小时,IgA及坛M扩散48小时,取出,测量白色沉淀环直径(毫米),查标准曲线,乘以血清稀释倍数,求得Ig含量。

 

标准曲线绘制:按说明书规定,稀释Ig参考血清,将不同稀释度的Ig参考血清分别加于相应的含抗Ig单价免疫血清琼脂板的小孔中,每孔10微升,按上述方法扩散,测量白色沉淀环直径(毫米)。以沉淀环直径为横座标,以馆含量为纵座标,在对数纸上作图,绘制标准曲线。

 

影响因素

 

1.当抗IgM血清稀释度为1:100时,形成的沉淀环清晰,沉淀环直径与浓度的对数成正比。抗体浓度再增高,形成的沉淀环较小但很清晰,降低抗休浓度,形成的沉淀环较大但不清晰,当抗体浓度过高或过低时,则沉淀环的直径与浓度的对数不成正比关系。应当选用抗体稀释度高、形成的沉淀环边缘清晰、沉淀环直径与浓度的对数成正比,又能检出体液中正常范围Ig值及最大限度的异常Ig值的那样一种稀释度。

 

2.购来的抗Ig血清,说明书上虽已注明抗体血清稀释度,但因在保存及运输过程中,抗Ig血清的效价可能下降,故应经常校正标准曲线。尤其是更换不同产地或不同批号更应重新绘制标准曲线,与原标准曲线对照。如前后结果相差显著,则应重新调整抗Ig血清实验的稀释度,以保证前后结果一致。应用单向环状免疫扩散试验测定体液中Ig含量的影响因素很多。在有标准化Ig参考血清的前提下,最重要的是琼脂板中抗Ig血清和抗原的浓度,以及二者的比例。抗体浓度高时,形成的沉淀环直径小较低浓度的杭原可能不形成沉淀环,抗体浓度低时,形成的沉淀环较大,较高浓度的抗原可能不形成沉淀环。只有抗体和抗原的浓度和比例适当,才能形成清晰的沉淀环,且其直径和挑原浓度的对数成正比。其次是琼脂的质量和琼脂板的厚度,琼脂板厚时所形成的沉淀环直径较小,薄时形成的沉淀环直径较大,应固定厚度,以1.5-2.0毫米为好。第三是扩散时间及温度,37时较22扩散快。在一定时间内沉淀环直径随扩散时间的延长而增大。一般情况下,37扩散24小时(IgG)45小时(IgAIgM)即可。

 

环状免疫扩散在洗涤剂污染血痕检材中的应用

 

在血痕种属检验中通常采用较为灵敏和快速的环状沉锭法。当遇有被肥皂、洗衣粉等污染的血痕检材时则往往得不到正确结果。采用琼脂单向免疫扩散法对常见洗涤剂污染的血痕检材进行实验,取得了满意的结果。使用(1)人血样品。(2)抗人血红蛋白血清(效价:110000)(3)琼脂糖,1.5%5%的肥皂液,1.5%5%伪洗衣粉液,1.5%5%的餐具洗洁精液(以上液体均用自来水配制而成)(4)加热磁性搅拌器、冰箱、培养皿。用环状免疫扩散鉴定微量血痕种属,实抗原在混有抗体的琼脂糖凝胶中溶解扩散,与周围的抗体结合,形成肉眼可见的环形。

First certified reference material for cystatin C in human serum ERM-DA471/IFCC.复制标题

第一份人血清胱抑素C的认证参考材料ERM-DA471/IFCC。

发表时间:2010-11-04

影响指数:3.6

作者: Grubb A

期刊:Clin Chem Lab Med

The IFCC Working Group for the Standardisation of Cystatin C (WG-SCC), in collaboration with the Institute for Reference Materials and Measurements (IRMM), announces the availability of the new certified reference material ERM-DA471/IFCC. The material was characterised using a pure protein primary reference preparation (PRP) as calibrant. The PRP was prepared from recombinant cystatin C, and its concentration measured using dry mass determination. The characterisation of ERM-DA471/IFCC was performed by particle enhanced immuno-nephelometry, particle enhanced immuno-turbidimetry, and enzyme amplified single radial immuno-diffusion. The certified cystatin C mass concentration in ERM-DA471/IFCC, if reconstituted according to the specified procedure, is 5.48 mg/L, the expanded uncertainty (k=2) being 0.15 mg/L.

译文

国际标准化组织Cystatin C标准化工作组(工作组- scc)与标准物质和测量学会(IRMM)合作,宣布新的标准物质ERM-DA471/IFCC的供应。该材料使用纯蛋白初级参考制剂(PRP)作为校准剂进行鉴定。以重组胱抑素C为原料制备PRP,采用干质量测定法测定其浓度。ERM-DA471/IFCC的特征是通过粒子增强免疫比浊法,粒子增强免疫比浊法和酶扩增单径向免疫扩散。ERM-DA471/IFCC中经认证的胱抑素C质量浓度,如果按照规定的程序重新合成,为5.48 mg/L,扩展不确定度(k=2)为0.15 mg/L。