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immuno-scatter turbidmetry

免疫

关键词免疫 实验技术 散射免疫比浊法

词汇介绍

拓展阅读

解析

scatter  英  /ˈskætə(r)/  美  /ˈskætər/

释    义   v. 撒播;散开;散布;驱散;散布于……上;散射(电磁辐射或粒子);(棒球)有效投(球);

               n. 零星散布的东西;离差;散射

例    句   Put all your eggs into one basket and then watch that basket, do not scatter your shot.把你所有的鸡蛋放到一个篮子里,然后小心的看好你的篮子,不要分散你的射击。

 

Turbidmetry

释    义   混浊度测定

例    句   immuno-scatter turbidmetry is easily affected by lipid blood.免疫散射比浊法易受到脂血的影响

概述

概述

 

散射免疫比浊法是指当一定波长的入射光沿水平方向射向抗原抗体反应体系时,反应体系中抗原抗体复合物微粒通过对入射光的折射和衍射形成散射光,散射光的强度与抗原抗体复合物的量呈正相关。当抗体的量一定且合适过量的情况下,抗原抗体复合物的量又与抗原的量呈正相关,通过抗原标准品或校准品绘制的标准曲线或校准曲线,即可计算出待测标本中抗原的量。

 

散射比浊的方法分类

 

1.终点散射比浊法

 

抗原和抗体反应达到平衡时,免疫复合物形成的量不再增加,反应体系的浓度不再变化,这个过程一般需要十分钟以上,终点散射比浊选择的检测时间是抗原抗体结合反应达到平衡,此时抗原抗体复合物的浓度不再受时间变化的影响,但又还没有出现絮状沉淀而影响浊度的判断。因此终点散射比浊法是在抗原抗体反应平衡时检测形成的抗原抗体复合物的总量。

 

技术要点:适当稀释待测样本与抗原标准品或校准品;将抗原标准液或校准液(56个浓度)和待测标本分别与适当过量的抗体混合,在一定条件下,抗原抗体反应完成后,在340nm处测定各反应管散射光强度;

 

方法学评价:本法可自动化,但反应时间较长,且检测灵敏度(ug/L)低于速率散射比浊法。

 

2.定时散射比浊法

 

抗原抗体相遇后沉淀反应立即开始,在反应初期极短时间内反应体系检测的散射光强度变化极不稳定,定时散射比浊法选择的检测时间避开抗原抗体反应初期的不稳定阶段,在抗原抗体反应趋于稳定某一时间开始测定,这样可以减少系统误差。

 

技术要点:终点散射比浊法需要扣除本底,因为抗原抗体反应的初期不稳定,短时间内反应体系散射光信号波动很大,此时获取的散射光强度计算出的结果误差较大,因此检测过程分两个时间点进行,在抗原抗体反应的初始阶段,加入少量标本与抗体反应,几秒钟后检测第一散射光信号,然后加入所有需要的标本,几分钟后检测第二次散射光信号,以第二次散射光信号减去第一次散射光信号,获得待测抗原与抗体反应而形成的免疫复合物对入射光的散射信号峰值,通过标准曲线即可换算出待测抗原的值。

 

方法学评价:本法可自动化,与终点散射比浊法比较,反应时间缩短,但检测灵敏度(ug/L水平)依然不及速率散射比浊法,且需要扣除本底。

 

3.速率散射比浊法

 

是一种抗原、抗体结合的动态测定法,所谓速率是指抗原-抗体在单位时间内结合形成分子量大于3×106的免疫复合物的速度。速率法是检测最大反应速率,也就是抗原和抗体反应速度达到最高峰。通过连续动态监测单位时间内形成的抗原抗体复合物微粒产生的散射光强度,可发现在某一单位时间内抗原抗体反应最快、散射光最强,这就是所谓的速率峰,速率峰的峰值大小与抗原浓度呈正相关。抗原抗体反应过程中,速率由慢变快,再又快变慢,多数抗原抗体反应的速率峰出现在20-25秒左右。速率峰出现的时间与抗体的浓度和其它抗原的亲和力有关。

 

技术要点:适当稀释待测样本与抗原标准品或校准品;对仪器校准;按照仪器使用说明书进行检测,由电脑对检测数据进行分析,可获得待测抗原含量。

 

方法评价:具有快速(30-60秒即可完成检测)、灵敏(可检测至ug.Lng/L水平)、准确、精密度高、稳定性好、检测范围广、不需扣除本底等优点,是一种高灵敏度、快速的自动化免疫化学分析仪。

 

免疫散射比浊法与免疫透射比浊法检测特定蛋白比较

 

这两种方法是现今检测人血清中特定蛋白的两种常用方法,大部分人认为用散射比浊法来测定血清特定蛋白比透射比浊法灵敏度高。但随着科技的发展,免疫技术以及全自动生化分析仪技术日趋完善,透射比浊法已经逐渐成熟,现已发展成为绝不逊于散射比浊法的特定蛋白常用检测方法。而且,免疫透射比浊法的试剂可以直接应用于全自动生化分析仪器,不仅提高了测试速度,还节约了检测成本。近年来,乳胶颗粒增强免疫技术的大量应用大大增加了抗原抗体复合物颗粒的直径,检测灵敏度得到明显的提高。特别是双乳胶颗粒连接的双抗体技术也得以应用于免疫透射比浊法,其中大乳胶颗粒包被了高反应性抗体,以提高分析灵敏度;小乳胶颗粒包被了低反应性抗体,以此来扩展测量范围,使得检测灵敏度及检测范围大大改善。

 

免疫透射比浊法对于干扰物颗粒较大的脂血、溶血样本具有更高的准确性,抗干扰能力优于免疫散射比浊法。因此与免疫散射比浊法比较,免疫透射比浊法具有优良的精密度、相似的分析灵敏度和检测范围,良好的抗干扰能力,且直接应用于全自动生化分析仪,更加实用和便利。

Understanding the glioblastoma immune microenvironment as basis for the development of new immunotherapeutic strategies.复制标题

了解胶质母细胞瘤免疫微环境作为开发新的免疫治疗策略的基础。

发表时间:2020-02-04

影响指数:7.6

作者: Pombo Antunes AR

期刊:Elife

Cancer immunotherapy by immune checkpoint blockade has proven its great potential by saving the lives of a proportion of late stage patients with immunogenic tumor types. However, even in these sensitive tumor types, the majority of patients do not sufficiently respond to the therapy. Furthermore, other tumor types, including glioblastoma, remain largely refractory. The glioblastoma immune microenvironment is recognized as highly immunosuppressive, posing a major hurdle for inducing immune-mediated destruction of cancer cells. Scattered information is available about the presence and activity of immunosuppressive or immunostimulatory cell types in glioblastoma tumors, including tumor-associated macrophages, tumor-infiltrating dendritic cells and regulatory T cells. These cell types are heterogeneous at the level of ontogeny, spatial distribution and functionality within the tumor immune compartment, providing insight in the complex cellular and molecular interplay that determines the immune refractory state in glioblastoma. This knowledge may also yield next generation molecular targets for therapeutic intervention.

译文

通过免疫检查点封锁癌症免疫治疗已证明其巨大的潜力,挽救了一部分晚期免疫原性肿瘤患者的生命。然而,即使在这些敏感的肿瘤类型中,大多数患者对治疗没有足够的反应。此外,其他类型的肿瘤,包括胶质母细胞瘤,大部分仍然是难治性的。胶质母细胞瘤免疫微环境具有高度的免疫抑制作用,是诱导免疫介导的癌细胞破坏的主要障碍。关于胶质母细胞瘤肿瘤中免疫抑制或免疫刺激细胞类型的存在和活性的零散信息,包括肿瘤相关的巨噬细胞、肿瘤浸润的树突状细胞和调节性T细胞。这些细胞类型在个体发生、空间分布和肿瘤免疫室功能水平上是异质性的,这为我们了解决定胶质母细胞瘤免疫难治性状态的复杂细胞和分子相互作用提供了依据。这一认识也可能产生下一代治疗干预的分子靶点。

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