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Linear immunoblotting

免疫

关键词免疫 实验技术 线性免疫印迹法

词汇介绍

拓展阅读

解析

Linear  英  /'lɪniə(r)/  美  /'lɪniər/

释    义   n. (Linear) (美)凌力尔(人名);

               adj. (linear) 线形的;线条构成的;一维的;直线的;连续的;长度的;涉及一连串直接相关的事物的

例    句   When I jokingly described him as one of the "linear people", he looked utterly bewildered, as if I'd created a category out of thin air.当我开玩笑地把他描述成“直线人”的一员时,他完全一脸困惑,好像我无中生有新创了一个类别似的。

 

immunoblotting  英  /'ɪmjʊnəʊblɒtɪŋ/  美  /'ɪmjʊnəʊblɒtɪŋ/

释    义   [免疫] 免疫印迹法

例    句   By way of immunoprecipitation and immunoblotting, the cytosolic protein tyrosine phosphorylation was examined.用免疫沉淀和免疫印迹法测定胞浆蛋白酪氨酸磷酸化情况。

概述

概述

 

线性免疫印迹法是将抗原固定在硝酸纤维素膜上,加入特定性的抗体和酶标记的在同一个膜条上检测10多种不同的自身抗体,由于操作简便,性价比高,在临床广泛应用。

 

检测原理

 

将抗原固定在硝酸纤维素膜上,加入特定性的抗体和酶标记的第二抗体后,再加入显色底物,底物被酶催化后使得硝酸纤维素膜上的条带显色,根据是否显色来判断结果的阴阳性。

 

优劣势

 

线性免疫印迹法是目前国内进行自身抗体检测使用频率最高的方法学,由于能在同一个膜条上检测10多种不同的自身抗体,非常适合于自身免疫疾病的筛查。此外,由于操作相对简单,又是单人份的试剂,可以在任何级别的医疗机构中开展,且线性免疫印迹法产品的性价比高。所以,线性免疫印迹法产品在国内的各级别实验室被普遍采用。

 

线性免疫印迹法虽然被广泛应用,但是线性免疫印迹法的劣势是只能提供定性/半定量检测结果。

 

线性免疫印迹法和酶联免疫吸附法检测抗核抗体的比较分析研究

 

抗核抗体的检测方法有很大的发展,目前常用的有免疫扩散法、化学发光法、酶联免疫吸附法、免疫印迹法和作为诊断AID金标准的间接免疫荧光法(IIF)等。由于抗原提纯技术的发展,酶联免疫吸附法和免疫印迹法等越来越多的被实验室所采用。有研究比较分析使用免疫印迹法检测抗核抗体谱(LIA-ANAs)和酶联免疫吸附法(ELISA)检测患者血清中抗核抗体水平的特点以评价两种方法用于辅助诊断自身免疫性疾病(AID)的临床价值。通过同时使用免疫印迹法和酶联免疫吸附法检测血清抗核抗体的病例3014记录每个病例的检测结果及患者的临床诊断。比较两种方法检测抗核抗体的结果分析其一致性。3014例中选取AID患者123健康对照组80比较两种方法检测的敏感度和特异度。结果表明LIA法与ELISA法检测抗核抗体结果总一致率为92.20%Kappa检验两者具有较好的一致性。LIA法和ELISA法检测抗核抗体的敏感度分别为82.1%78.9%特异性分别为92.5%90.0%两种方法检测自生免疫性疾病患者的ANA敏感度和特异度差异无统计学意义。结论表明两种方法都具有较高的敏感度和特异度均可应用于临床检测。两种方法相结合即ELISA法作为初筛试验、LIA法作为确诊试验联合应用更具临床意义。

Binding of peanut allergen Ara h 2 with Vaccinium fruit polyphenols.复制标题

花生过敏原Ara h 2与越橘果实多酚的结合。

发表时间:2019-06-30

影响指数:5.4

作者: Plundrich NJ

期刊:Food Chem

The potential for 42 different polyphenols found in Vaccinium fruits to bind to peanut allergen Ara h 2 and inhibit IgE binding epitopes was investigated using cheminformatics techniques. Out of 12 predicted binders, delphinidin-3-glucoside, cyanidin-3-glucoside, procyanidin C1, and chlorogenic acid were further evaluated in vitro. Circular dichroism, UV-Vis spectroscopy, and immunoblotting determined their capacity to (i) bind to Ara h 2, (ii) induce protein secondary structural changes, and (iii) inhibit IgE binding epitopes. UV-Vis spectroscopy clearly indicated that procyanidin C1 and chlorogenic acid interacted with Ara h 2, and circular dichroism results suggested that interactions with these polyphenols resulted in changes to Ara h 2 secondary structures. Immunoblotting showed that procyanidin C1 and chlorogenic acid bound to Ara h 2 significantly decreased the IgE binding capacity by 37% and 50%, respectively. These results suggest that certain polyphenols can inhibit IgE recognition of Ara h 2 by obstructing linear IgE epitopes.

译文

利用化学信息学技术研究了维甲酸果实中42种不同的多酚与花生过敏原Ara h2结合并抑制IgE结合表位的潜力。在12个预测结合物中,delphinidin-3-glucoside、氰化物-3-glucoside、原花青素C1、绿原酸在体外得到进一步评价。圆二色性、UV-Vis光谱学和免疫印迹法确定了它们(i)结合Ara h2、(ii)诱导蛋白二级结构改变和(iii)抑制IgE结合表位的能力。紫外-可见光谱表明原花青素C1和绿原酸与Ara h2相互作用,圆二色性结果提示与这些多酚相互作用导致Ara h2二级结构的改变。免疫印迹显示,原花青素C1和绿原酸与Ara h2结合后,IgE的结合能力分别显著降低37%和50%。这些结果表明,某些多酚类物质可以通过阻断线状IgE表位来抑制Ara h2的IgE识别。

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