OBJECTIVE:To elucidate the function of cytosolic malate dehydrogenase (Mor2) in oocyte maturation and embryo development using RNA interference (RNAi).
DESIGN:Experimental animal study.
SETTING:Research unit of university.
ANIMAL(S):Female 4-week-old (C57/BL6) mice.
INTERVENTION(S):Isolation of immature germinal vesicle (GV) oocytes or fertilized pronucleus (PN) embryos, microinjection of Mor2 double-stranded RNA (dsRNA), and reverse transcription and polymerase chain reaction (RT-PCR) analysis to investigate Mor2-specific messenger RNA (mRNA) knockdown.
MAIN OUTCOME MEASURE(S):Relative changes in mRNA levels after microinjection of Mor2 dsRNA and in rates of oocyte maturation and preimplantation embryo development.
RESULT(S):Mor2 mRNA mostly was knocked down in germinal vesicle- and metaphase I (MI)-arrested oocytes, compared with metaphase II (MII)-developed oocytes, after microinjection of Mor2 dsRNA and in vitro culture for 16 hours. In vitro oocyte maturation was significantly decreased (34%), compared with noninjected (73.4%) and buffer-injected (67.5%) control groups. The rate of blastocyst development (48.1%) was lower in the Mor2 dsRNA-injected group than in buffer-injected control (88.2%).
CONCLUSION(S):In the present study, the function of Mor2 was analyzed with the aid of RNAi. On the basis of the data obtained, we propose that Mor2 is an essential factor for oocyte maturation and embryo development in mouse.
-
【Role of cytosolic malate dehydrogenase in oocyte maturation and embryo development.].
【细胞质苹果酸脱氢酶在卵母细胞成熟和胚胎发育中的作用。】
复制标题
收藏
DOI：10.1016/j.fertnstert.2006.02.105文章类型：杂志文章
复制DOI
译文
目的：利用RNA干扰技术（RNAi）阐明胞质苹果酸脱氢酶（Mor2）在卵母细胞成熟和胚胎发育中的功能。
设计：实验动物研究。
单位：大学研究单位。
动物：4周龄雌性（C57 / BL6）小鼠。
干预：分离未成熟的生小泡（GV）卵母细胞或受精的原核（PN）胚胎，显微注射Mor2双链RNA（dsRNA），以及反转录和聚合酶链反应（RT-PCR）分析以研究Mor2-特定的信使RNA（mRNA）敲低。
主要观察指标：微量注射Mor2 dsRNA后mRNA水平以及卵母细胞成熟和植入前胚胎发育的相对变化。
结果：显微注射Mor2 dsRNA并进行体外培养16小时后，与生中期II（MII）发育的卵母细胞相比，生胚囊泡和中期I（MI）发育的卵母细胞中Mor2 mRNA大部分被敲低。与未注射（73.4％）和注射缓冲液（67.5％）的对照组相比，体外卵母细胞成熟显着降低（34％）。注入Mor2 dsRNA的组的胚泡发育率（48.1％）低于注入缓冲液的对照组（88.2％）。
结论：在本研究中，借助于RNAi分析了Mor2的功能。根据获得的数据，我们建议Mor2是小鼠卵母细胞成熟和胚胎发育的重要因素。
设计：实验动物研究。
单位：大学研究单位。
动物：4周龄雌性（C57 / BL6）小鼠。
干预：分离未成熟的生小泡（GV）卵母细胞或受精的原核（PN）胚胎，显微注射Mor2双链RNA（dsRNA），以及反转录和聚合酶链反应（RT-PCR）分析以研究Mor2-特定的信使RNA（mRNA）敲低。
主要观察指标：微量注射Mor2 dsRNA后mRNA水平以及卵母细胞成熟和植入前胚胎发育的相对变化。
结果：显微注射Mor2 dsRNA并进行体外培养16小时后，与生中期II（MII）发育的卵母细胞相比，生胚囊泡和中期I（MI）发育的卵母细胞中Mor2 mRNA大部分被敲低。与未注射（73.4％）和注射缓冲液（67.5％）的对照组相比，体外卵母细胞成熟显着降低（34％）。注入Mor2 dsRNA的组的胚泡发育率（48.1％）低于注入缓冲液的对照组（88.2％）。
结论：在本研究中，借助于RNAi分析了Mor2的功能。根据获得的数据，我们建议Mor2是小鼠卵母细胞成熟和胚胎发育的重要因素。
